我们培养红曲霉一般都使用麦芽汁琼脂培养基进行培养,一般地,红曲霉在这样的培养基中能够生长的很好,并且菌落比较大。在培养基培养的初期阶段,菌落大多为白色,在生长成熟后变为淡红色、紫红色、橙红色、烟灰色等等。因为菌落的种类不同,颜色上往往会有较大的差异。菌落也有多种形状,有呈绒毡状的、也有呈皮膜状的。一般来说,呈皮状的菌落的皱褶比较少,或者仅仅只有一些辐射的纹路。
红曲霉在马铃薯培养基上的生长比较局限,并不像平常那样在麦芽汁琼脂肆意的蔓延,某些菌种在马铃薯培养基上会形成疮疤状的菌落,在这样的培养基中,红曲霉产生的常常为水溶性红色素,能够分泌在培养基中,然后使培养剂着色。所以在进行培养的时候,应当根据需求选择合适的培养基。
在进行分离纯化时,首先需要配制半合成固体培养基,还需要进行高压蒸汽灭菌处理,准备无菌水和移液管等物品,留有灭菌备用。在进行实验前应当将培养基倒在平皿中,经过冷凝或需要在培养箱中放置五个小时左右,用来烘干冷凝水。分离纯化过程需要保温杀菌,杀死其中不耐热的细菌和菌母,将上层的悬液用稀释涂平板法进行分离。还需要挑取能够产生红曲霉色素的霉菌单菌落,然后还需要用显微镜进行检查,判断它是否为纯种。进而辨别细胞形态是否一致,在进行确认之后进行保存。
最后需要将菌落进行保藏,主要有五种保藏方法,分别为斜面保藏、矿油保藏、曲粉保藏、沙土管保藏和制曲保藏这些保藏方法。在整个实验中需要注意为无菌操作,防止杂菌的污染。因为菌落比较大,所以在这一个过程中,为了能够很好的挑取单菌落,在分离的时候稀释度应当稍微大一些。
元代以来红曲的制法在《居家必用事类全集》、《墨 娥小录》、《本草纲目》、《天工开物》、《物理小识》中都有 记载。《居家必用事类全集》、《本草纲目》、《物理小识》三书制法相同,《天工开物》,《墨娥小录》二者又相同。 故实际上有两种较为独立的方法流传于世。
现将《居家必用事类全集》和《天工开物》中的制 法要点简述如下:制红曲,必先造曲母。曲母实际上就是红酒糟。 该红酒糟是用红曲酿成的酒糟。曲母的酿法与一般 酿酒法相同。制红曲的原料为籼米或粳米。?《居家必用事类全集》浸米仅一宿;《天工开物》浸七日,浸至其气臭恶 不可闻。
《居家必用事类全集》所载的蒸饭仅蒸至八 分熟,《天工开物》中蒸饭则分作两个阶段,先蒸至半生不熟,出离釜中,冷水沃之后再蒸至极熟。米饭的酸化处理方式不同,《天工开物》本中,米 经过长时间的浸泡,米粒已经酸化,在加入红曲母时 再加明矾水拌匀。明矾是硫酸钾和硫酸铝的复盐,其水溶液为酸性。
《墨娥小录》本中则加入滴醋调酸。两 者方法虽不同,但原理是一致的。红曲与其他种类酒曲在制法上最显著的区别可能就在于制曲原料的酸 化处理上。这是根据红曲霉菌的耐酸性特点而采用的。经现代科学证明,红曲霉菌的最适生长pH值为 3?4之间。在此pH范围内酵母菌难于繁殖,细菌生 长更是受到抑制,红曲霉菌却安然无恙,可正常生长。
培菌过程中,米饭一般装入篾盘,置于木架上, 分层叠放,盘上有覆盖物。这一期间,曲的外观颜色 发生一系列的显著变化,如《天工开物》中所说:“其初雪白色,经一二日成至黑色,黑转褐,褐转代赭,赭 转红。红极复转微黄。目击风中变幻。”颜色的变化反映了微生物分泌红色素量的不断增加。
最后变黄,可 能是由于红曲霉也能分泌黄色素。培菌过程中最重要的操作是翻拌,堆积,摊开和分段用水润曲,“候视 者七日之中,即坐卧盘架之下,眠不敢安,中宵数起。”分段用水润曲的做法是用大桶盛新汲井水,以 竹箩盛曲,浸入水中后立即提起。关于润曲的时机,《天工开物》注明:“凡黑色转褐,褐转红,皆过水一 度。
红则不复入水”。用水润曲的机理主要是控制曲中的水分。红曲的特性是既有糖化能力,又有发酵能 力。如果米中含水分太多,红曲霉会使米粒中的淀粉变成酒精,做成的红曲是空心的。如果米中的水分太低,红曲霉的菌丝进不到米粒里面去,做成的红曲是 红皮白心的。
消除红曲霉菌的操作如下:
1. 一般情况下,红曲霉菌感染引发的症状较轻,因此患者不需要太担心,应保持良好的心态,以乐观积极的态度面对,并且主动及时地采取治疗措施。
2. 患者可以用开水清洗,将开水直接倒进有霉菌的锅内进行浸泡,待霉菌刷掉后,用洗洁精清洗,最后再用清水清洗即可。
3. 患者还可以将长霉菌的锅放在阳光下暴晒5-6小时,再清洗干净。
4. 患者还可以使用白醋清洗,将白醋倒入发霉长毛的锅内,然后盖上盖子密封1小时,然后锅中倒入水加热半小时即可。
如果您感染了红曲霉菌,请尽快咨询医生以获取专业的诊断和治疗建议。
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