DNA溶解曲线的特点是什么

DNA溶解曲线的特点是什么

熔解曲线是指随温度升高DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。熔解曲线分析可以用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物。

DNA溶解曲线的特点可以概括为是一个“微笑曲线”，其形状像是左右被拉长的“U”。DNA溶解曲线的最低点对应的横坐标氯化钠浓度为零点一四摩尔每升，原因是DNA在零点一四摩尔每升氯化钠溶液中的溶解度最小，而往右往左DNA的溶解度都会增大，所以DNA溶解曲线的形状是呈微笑状。

hrm溶解曲线怎么看

hrm溶解曲线看法：根据DNA序列的长度，GC含量以及碱基互补性差异，应用高分辨率的熔解曲线对样品进行分析，极高的温度均一性和温度分辨率使分辨精度达到对单个碱基差异的区分。

双链核苷酸的热稳定性受其长度和碱基组成的影响，序列变化会导致升温过程中dsDNA解链行为的改变。因为所用的荧光染料只能嵌入并结合到dsDNA上。

因此利用实时PCR技术，通过实时检测dsDNA熔解过程中荧光信号值的变化，就能以生成不同形状熔解曲线的方式将PCR产物中存在的差异直观地展示出来。

技术特点

相对于其它基于 PCR 的 DNA 多态性检测技术如单链构象多态性（single strand conformation polymorphism，SSCP）、变性高效液相色谱（denaturing high-performance liquid chromatography，dHPLC）、变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE）等，HRM 的优势在于操作简单，分析时间短，灵敏度和特异性高。

怎么通过Q-PCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果，如何通过曲线来判断结果的好与坏？

具体要看你做什么实验，模板和扩增的基因实怎样的。
1、扩增曲线：一般来说如果你做双ΔCT法那么你的扩增曲线必须是S型，有明显的四个时期，且复孔的CT值尽量一致，相差不要超过0.5个CT值（上限是1个CT值）；同一个基因在不同浓度的相同模板下扩增，其相差的CT值为相差浓度倍数的2次开方。比如同一种CDNA5倍浓度稀释，那么同一种基因扩增的前提下，5倍浓度模板的CT值会比1倍浓度模板的CT值提前2.3个循环左右，以此类推，当然这是理论值；另外阴性对照不能有扩增（40个循环以后出CT值属正常现象，也可算作没有扩增）。
2、溶解曲线：溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线，顾名思义，其跟模板（或其浓度）没有关系，扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线，类似于电泳。那么你扩增几种基因就应该有几种对应的峰（一般SYBR法的目的基因在80~90℃之间），我说的是一般情况，这个跟扩增片段长短有关系。出现其他峰就该考虑是否为引物二聚体（一般为60~75℃之间）视引物长度而定，而基因组DNA污染的峰会在90℃以后。出现引物二聚体可能是引物设计、引物加量等原因（也有可能是从加完反应液到上机开始PCR这之间的时间过长）所致；基因组DNA那么考虑设计跨内含子引物或者实验之前做gDNA的消除工作。而阴性对照有目的峰那可能就是模板污染，注意实验操作等避免模板污染。
纯手打，支持下。