he染色的操作步骤(细胞he染色时没有用到二甲苯为什么还要用酒精脱水)

he染色的操作步骤

he染色的操作步骤：

1、将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟；

2、放入酸水及氨水中分色，各数秒钟；

3、流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻；

4、入百分之七十和百分之九十酒精中脱水各10分钟；

5、酒精伊红染色液染色两分钟到三分钟；

6、染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明即可；

7、将已透明的切片滴上树胶，盖上盖玻片封固；

8、待树胶略干后，贴上标笺，切片标本即可使用。

细胞he染色时没有用到二甲苯为什么还要用酒精脱水

染色流程(1)二甲苯（Ⅰ） 15min (2) 二甲苯（Ⅱ） 15 min (3)100%乙醇（Ⅰ） 5min (4)100%乙醇（Ⅱ） 5 min (5)80%乙醇 5min (6)蒸馏水 5 min (7)苏木精液染色 5 min (8 ) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s (9) 1%盐酸乙醇 1-3 s (10) 稍水洗 10-30 s (13)蒸馏水过洗 1-2 s (14) 0.5%伊红液染色 1-3 min (15) 蒸馏水稍洗 1-2 s (16) 80%乙醇稍洗 1-2 s (17) 95%乙醇（Ⅰ） 2-3 s (18) 95%乙醇（Ⅱ） 3-5 s (19) 无水乙醇 5-10 min (20) 石炭酸二甲苯 5-10 min (21) 二甲苯（Ⅰ） 2 min (22) 二甲苯（Ⅱ） 2 min (23) 二甲苯（Ⅲ） 2 min (24) 中性树胶封固 注：①第（10）、（11）步可省去,（12）步冲水时间需延长至20-30min.②第（20）步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇.* 冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定 10～30 s （2）稍水洗 2 s （3）苏木精液染色（60℃） 30～60 s （4）流水洗去苏木精液 10 s （5）1%盐酸乙醇 3 s （6）稍水洗 2 s （7）促蓝液返蓝 10 s （8）流水冲洗 15～30 s （9）0.5%曙红液染色 30～60 s （10）蒸馏水稍洗 2 s （11）80%乙醇 2 s （12）95%乙醇 2 s （13）无水乙醇 2 s （14）石炭酸二甲苯 3 s （15）二甲苯（Ⅰ） 3 s （16）二甲苯（Ⅱ） 3 s （17）中性树胶封固.注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇.染色结果：细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色.4．12 切片脱水透明 切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖.如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色.切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石碳酸二甲苯进行脱水.石碳酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去.

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