因素:
1、蛋白质的水化作用,水膜或水化层;
2、蛋白质颗粒在非等电点时带有相同电荷。
沉淀蛋白质的主要方法有:
1、加高浓度中性盐;
2、重金属盐沉淀蛋白质;
3、生物碱试剂和某些酸类沉淀蛋白质;
4、有机溶剂沉淀蛋白质;
5、加热凝固。
蛋白质溶液胶体系统的稳定性依赖于以下两个基本因素:
(1)蛋白质表面形成水化层 由于蛋白质颗粒表面带有许多如一NH3+;、一COO-、一OH、一SH、一CO一NH,肽键等亲水的极性基团,因而易于发生水合作用(hydration),进而使蛋白质颗粒表面形成一层较厚的水化层。水化层的存在使蛋白质颗粒相互隔开,使蛋白质颗粒不致聚集而沉淀。每1g蛋白质结合水0.3~0.5g。
(2)蛋白质表面具有同性电荷 蛋白质溶液除在等电点时分子的净电荷为零外,在非等电点状态时,蛋白质颗粒皆带有同性电荷,即在酸性溶液中带正电荷,在碱性溶液中带负电荷,与其周围的反离子构成稳定的双电层。蛋白质胶体分子间表面双电层的同性电荷相互排斥,进而阻止其聚集而沉淀。
扩展资料
胶体分散系统的稳定性主要取决于水化作用与胶粒的电荷二因素,现将亲水胶和疏水胶的稳定性分别讨论如下:
1、亲水胶体的稳定性
主要靠其强的溶剂化作用与胶粒的水化层。由于胶粒周围的水化层阻碍了粒子的相互聚结,水化层越厚,稳定性越大。因此,凡能破坏胶粒水化层的因素,均能引起亲水胶体的不稳定。如在亲水胶体中添加少量电解质时,不会因相反电荷的离子作用而引起凝结。
一旦水化层被除去,形成了疏水胶粒后,则很容易发生凝结面析出沉淀。例如阿拉伯胶、琼脂等胶液中添加乙醇脱水后,胶粒失去水化层,遇阳离子即发生凝结。
同样,若在亲水胶体中加入大量电解质,由于电解质离子本身具强烈的水化性质,加入后,脱掉了胶粒的水化层,也必引起凝结与沉淀。此作用称为盐析。
在亲水胶体中加入大量乙醇、丙酮、糖浆等脱水剂,亦可使溶剂化了的胶粒水化层破坏,脱水而析出。或者虽未析出,但对电解质的敏感性增加而更易盐析。
亲水胶体若久经光、热、空气等影响而发生化学变化,其变化产物又具有较小的溶解度时,也会出现凝结现象。如在胶体溶液中加入不相混合的液体后通电,或猛烈振摇,或煮沸、冰冻时,均能产生部分或全部胶粒的凝结。紫外线与X射线亦能使胶液对电解质敏感。
2、疏水胶体的稳定性
由于其胶粒不能水化而主要靠粒子表面带相同电荷,互相排斥才免于凝结而得稳定。但疏水胶粒只有在构成吸附层的吸附离子和部分异性离子存在时才能带电而具一定程度稳定性。若将疏液胶体(一般指溶胶)中少量电解质用透析法除去,胶粒失去电荷,胶体就产生凝结而沉淀。
因此,胶体中必须有少量电解质的存在作稳定剂,其正负电荷组成胶粒的双电层结构,使疏水胶粒带一定量电荷而达到一定程度的稳定作用。
电解质的加入量必须适当,若加入过多,随着外加离子浓度的增加,可将原来分布在扩散层中的异性离子挤到吸附层中,使其离予吸附层较远的扩散层中异性离子向吸附层靠近,使扩散层逐渐变薄,降低了起稳定作用的电位。当电位降至临界值下,胶粒发生凝结。可见溶胶对电解质是敏感的。
参考资料来源:百度百科-蛋白质胶体
参考资料来源:百度百科-胶体溶液
蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面带有水化膜。
维持蛋白质溶液稳定的因素是水化膜和同种电荷。由于蛋白质的表面有很多亲水基团,会吸引很多的水分子,形成水化膜,使蛋白质颗粒不容易聚集起来,另一方面蛋白质分子在一定的PH值溶液中往往带有同种电荷而相互排除,因此,蛋白质溶液是稳定的亲水胶体。
根据蛋白质胶体稳定性原理,可以通过破坏这两个主要稳定因素,使蛋白质分子间的引力增加聚集沉淀。如盐析法、有机溶剂沉淀法。
如果加人适当的试剂使蛋白质分子处于等电点状态或失去水化层,蛋白质的胶体溶液就不再稳定并将产生沉淀。蛋白质溶液可因下列试剂的加入而发生蛋白质沉淀。
扩展资料
根据蛋白质溶解度不同的分离方法
1、盐析法
蛋白质具有胶体性质,维持胶体稳定的因素是蛋白质颗粒的表面电荷层和水化膜,盐析法就是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等中性盐加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和,水化膜被破坏,导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。
盐析时若溶液 pH 在蛋白质等电点处效果更好(蛋白质在等电状态时颗粒之间静电斥力最小,溶解度也最小)。
因各种蛋白质分子颗粒大小、亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度不同,调节混合蛋白质中的中性盐浓度可使各种蛋白质分段沉淀。
2、低温有机溶剂沉淀法
与水可混溶的有机溶剂(丙酮、乙醇等)可使多数蛋白质溶解度降低并析出。
参考资料来源:百度百科-蛋白质胶体
本站内容仅供参考,不作为诊断及医疗依据,如有医疗需求,请务必前往正规医院就诊
祝由网所有文章及资料均为作者提供或网友推荐收集整理而来,仅供爱好者学习和研究使用,版权归原作者所有。
如本站内容有侵犯您的合法权益,请和我们取得联系,我们将立即改正或删除。
Copyright © 2022-2023 祝由师网 版权所有