怎样研究基因功能(如何根据一个单位点的突变体,研究一个基因的功能？)

怎样研究基因功能

研究基因功能方法，简介如下：

1、基因转导技术：用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞的一种技术。

2、反义核苷酸技术：通过碱基互补原理,干扰基因的解旋、复制、转录、信使核糖核酸的剪接加工乃至输出和翻译等各个环节,从而调节细胞的生长、分化。

3、核酶技术：化学本质是核糖核酸, 具有酶的催化功能。核酶的作用底物可以是不同的分子, 作用底物是同一分子中的某些部位。

4、基因敲除和嵌入技术：指一种遗传工程技术，针对某个序列已知但功能未知的序列，

如何根据一个单位点的突变体,研究一个基因的功能？

以下从植物领域来讲：
常规情况下，获得突变体后当定位克隆控制该性状的基因。找到突变位点后进行一些基本的分子实验和生信分析：
1）构建promoter+gDNA的互补载体，转化突变体，观察是否互补表型
2）构建Actin/Ubiquitin/35S+CDS+标签的载体，转化突变体，观察目的基因过表达的表型，同时标签蛋白可用于下游分子实验
3）构建CRISPR/Cas9敲除载体，观察在目的基因敲除下产生的表型
4）明确基因组织表达模式，亚细胞定位情况
5）paralog和ortholog是否有过研究，突变位点保守性如何
6）目的基因编码何种蛋白，有什么功能，突变位点位于哪个结构域，可能对蛋白功能造成哪些影响

如何对一个新的ncrna基因进行功能研究

一般的研究思路（针对真核细胞蛋白）： 1. 克隆后，在细胞内过量表达，看有啥变化 2. 检测不同细胞内的表达水平，设计RNAi, 在表达水平高的细胞内阻断该蛋白的产生。
看有啥变化。 3. 至于在大肠杆菌中的表达，是要研究蛋白质本身的性质，比如结

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