现在用得多的是酶联法,其实检查方法是什么不重要,现在你检查结果是阴性,所以不用紧张。
目前艾滋检测方法很多,步骤也不同。可以到医院或疾控免费检测,也可在家自测唾液收集器天猫检测项目的样品种类
1. HIV 抗体检测:全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品。
2. HIV 抗原检测:全血、血清、血浆、病毒培养上清液。
3. T 淋巴细胞亚群测定:EDTA 或肝素抗凝全血。
4. HIV-1 病毒载量、基因型、耐药检测:血浆、滤纸干血斑(DBS)。
5. HIV 核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1 分离培养:淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞(PBMC)及全血。
当然,实验室最常用的仍然是血液标本,其他只作为补充样本。
HIV 抗体检测
HIV 抗体检测是艾滋病实验室检测的优先选择项目,在国内绝大多数初筛实验室应用最广泛。
1. 初筛方法
(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)
ELISA 法检测 HIV 抗体是 HIV 初筛实验室最常用最普遍的方法,目前检测试剂已经发展到第四代,即同时检测血液中 HIV-1P24 抗原和 HIV-1/2 抗体,秉承「宁可错杀一千,不可漏网一个」的革命精神,其灵敏度远高于特异性,直叫 HIV 抗体无处遁形。
(2)化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA)
这个试验方法是近 10 年迅猛发展的一种新型检测方法,其采用发光或荧光底物,既可检测抗体,也可联合检测抗原抗体,用发光或荧光仪测定结果,其灵敏度较 ELISA 有了进一步的提高,同时带来的是检测成本的增加和假阳性率的增高。
(3)快速检测(RT)方法
此类方法操作简便快速,适用于应急检测、门诊急诊检测,但灵敏度和特异性远不如 ELISA 和发光法,但是经济实惠,也有一定的市场影响力。主要包括以下几种方法:明胶颗粒凝集试验(PA)、免疫渗滤试验、免疫层析试验。
2. 确认实验
(1)免疫印迹试验(WB)
WB 采用间接法检测样品中的抗 HIV-1/HIV-2 特异性抗体。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的 HIV-1 蛋白分离开来,经过一系列处理后,硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带,从而确诊抗体的存在。
(2)条带/线性免疫试验(RIBA/LIA)
实验原理基本同 WB 法,不再赘述。
HIV-1 抗原检测
1. 筛查实验
(1)酶联免疫吸附实验(ELISA 法):即第四代抗原抗体联合检测试剂盒。抗体包被固相反应孔(管)的底部,待测样本中 P24 抗原与包被抗体形成抗原抗体复合物,再加入酶(HRP)标记的 HIV-1 抗体与抗原结合,加底物显色,在酶标仪上读取结果。因同时检测抗原抗体,灵敏度大大提高,有效缩短了 HIV 感染的检测窗口期,但因试剂成本较高,在普通筛查实验室推广有一定难度。
(2)酶联荧光分析法(ELFA):待测样品的 p24 抗原与包被在固相孔(管)内的 p24 抗体结合,并被生物素标记的 p24 抗体识别。临床实验室应用前景不明朗,需要荧光检测设备,成本较高。
(3)电化学发光法(ECLIA):待测样品的 p24 抗原与包被抗体的磁性微粒和发光剂标记的抗体在反应管中温育,形成磁性微珠包被抗体-抗原-发光剂标记抗体复合物。
(4)抗原抗体快速检测法:同快速方法(RT)检测抗体,不同之处是用 HIV 抗体包被载体,检测灵敏度同样较差。
2. 中和试验
中和试验主要是 p24 抗原检测的补充试验,还可做 HIV-1RNA 的定性或定量检测,以排除筛查试验的假阳性。
(1)酶联免疫吸附实验(ELISA 法):待检样品先与中和剂(p24 抗原的抗体)共同孵育,如果样品中存在 p24 抗原,中和抗体将与之结合形成复合物,而不能与固相载体上的捕获抗体结合。
(2)酶联荧光分析法(ELFA):原理和检测步骤同上述酶联免疫吸附实验(ELISA 法),中和率 ≥ 60 %,认为样品中的 p24 抗原是真阳性。
(3)电化学发光法 (ECLIA):原理和检测步骤同上述酶联免疫吸附实验(ELISA 法),中和率大于 50%,认为样品中的 p24 抗原是真阳性。
HIV 核酸检测
目前国内 HIV 核酸检测试剂主要为 Taqman 实时荧光 PCR 检测试剂,可检测血浆、血清、组织器官或血液制品的 HIV-1RNA 和 DNA,DBS 可用于检测 RNA/DNA。全球目前正式用于临床诊断 HIV-1 急性期感染的核酸检测试剂比较少,主要是美国 FDA 批准的 Gen-Probe 公司生产的 Aptima HIV-1 RNA 核酸定性检测试剂和欧盟批准的 Abbott M2000 HIV-1 RNA/DNA 定性检测试剂。
临床诊断相关的检测策略及结果报告
HIV 检测阳性结果的检测过程一般经历两个阶段,初筛和复检程序。以 HIV 抗体检测为例,具体流程如下:
试剂 1 进行初筛,结果无反应,报告「HIV 抗体阴性」;结果有反应,不能出具阳性报告,必须进入复检试验。对初筛有反应的样品,用原有试剂双份或双孔进行复检试验(或者两种试剂复检),如均无反应,报告「HIV 抗体阴性」;如均有反应或一个有反应一个无反应,进行补充试验(抗体确证试验和 HIV-1 核酸试验),报告 HIV 感染待确定。
确定您是否有高危行为。
?如果要自查自己是否感染了艾滋病病毒,首先要考虑自己是否有过高危性行为。 艾滋病主要通过血液传播,但大多数人是因为不正当的性行为而感染艾滋病的,尤其是性工作者感染的风险非常高。 如果你有过高危性行为,事后一天突然发高烧,而且高烧一直持续,用普通药物治疗无效,就需要考虑是否感染了艾滋病。
试纸检测?
在世界艾滋病日会议上,联合国艾滋病规划署提倡主动进行艾滋病毒自我检测以了解您的艾滋病毒状况。 自我检测艾滋病毒可以更好地保护隐私,减轻人们对个人信息泄露的恐惧。 艾滋病试纸作为初筛诊断产品,临床使用多年,灵敏度高、特异性高,综合准确率达99%以上。 为了方便大家操作,将HIV检测试纸放入塑料盒中,使用更加方便,检测原理不变,依旧是双抗原夹心法。 各部分说明如下:
第一步小圆孔(S区)为加样孔,待测血滴应滴入此孔。 狭长凹陷区域为判定结果区域,其中T为检测线位置,C为对照线位置。?
第二步:采血 采血器具:采血针(也可用中粗缝纫针)、酒精、棉球。 采血部位:指尖或耳垂。 采血方法:先用酒精棉球对采血部位和采血针进行消毒,然后采集准备。 注意:第一滴血应丢弃,第二滴和第三滴血用于检测。 将血滴直接滴入样品孔中,或先吸进干净的吸管中,再滴入样品孔中。
第三步:解释结果 在添加样品后 10-15 分钟内观察结果。??
? 1、试纸上只出现一条红线(对照线C)为阴性结果;
? 2、试纸上出现两条红线,(对照线C和检测线T)为阳性结果;
? 3、试卷上没有出现红线,表示测试实验失败,请换一张卡片重新测试。
需要指出的是,既然任何检测实验都有“假阳性”的结果,如果出现阳性结果也不要紧张,可以去当地疾控中心确认,也可以咨询我们,当然,这一切都是 机密的。 对于阴性结果,如果过了“窗口期”后检测出阴性结果,就说明你没有感染艾滋病毒,完全可以放心。
1、抗体检测
主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。ELISA用去污剂裂解HⅣ或感染细胞液提取物作抗原,IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测,如果发现阳性标本应重复一次。为防止假阳性,可做Westernblot(WB,蛋白印迹法)进一步确证。
WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HⅣ蛋白进行分离,再经传移电泳将不同蛋白条
艾滋病检测带转移于硝酸纤维膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶标抗体染色,就能测出针对不同结构蛋白抗体,如抗gp120、gp41、P24抗体,特异性较高。
快速检测法,也称为金标法,也是抗体检测的一种方法,根据免疫层析法的原理,用于HⅣ抗体检测的定性检测。
2、抗原检测
用ELISA检测P24抗原,在HⅣ感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原,来提高敏感性。
3、核酸检测
用PCR法检测HⅣ基因,具有快速、高效、敏感和特异等优点,目前该法已被应用于HⅣ感染早期诊断及艾滋病的研究中。
4、病毒分离
常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。
5、检测试纸检测
艾滋病检测试纸条是使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂。它可检测血清或血浆标本中的HⅣ-1/2特有性抗体。所有操作时间若是15分钟,动作简便、迅速、准确、自带质
艾滋病检测控对照、无需所有附加药剂。适合个人检测,也适合各大医院,疾控中心检测。
◆ 疾病知识,医学知识,临床知识,健康科普知识,为您疾病康复提供帮助 酶标法是指使用酶联免疫吸附试验(ELLsA )来检测HIv 抗体.这种方法是根据酶免疫测定原理发展的一种技术,其基本方法分三类:间接法、双抗原夹心法和抗体竞争法。目前国内外主要使用的是第三代(双抗原夹心法)试剂。血源筛查以第三代ELISA 为主,国际上有些国家和地区已经将第四代ELISA 试剂(线性免疫酶测定)用于血源筛查。第四代ELISA 试剂是最近发展起来的HIv 抗原抗体联合测定试剂,可同时检测艾滋病的抗原和抗体。与第三代试剂相比,它可以降低血源筛查的残余危险度,其确切的临床效果,还有待进一步评估。 来源:浙江省医学会资料提供,版权所有,未经许可,不得转载
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