抗A、抗B血型定型试剂的禁忌

用抗A和抗B血清确定血型，此为临床检验室常用的正定型法
加入血清后，若抗A管发生凝集反应，而抗B不发生凝集，则证明红细胞膜上带有A抗原，血型为A型
加入血清后，若抗B管发生凝集反应，而抗A不发生凝集，则证明红细胞膜上带有B抗原，血型为B型
加入血清后，若抗A抗B管均发生凝集反应，则证明红细胞膜上带有A、B抗原，血型为AB型
加入血清后，若抗A抗B管均不发生凝集反应，则证明红细胞膜上没有A、B抗原，血型为O型

顺便说Rh血型，和ABO血型系统的鉴定方法相同
加入标准抗D血清后，若发生凝集反应，则证明红细胞膜上有D抗原，Rh血型为阳性
加入标准抗D血清后，若不发生凝集反应，则证明红细胞膜上没有D抗原，Rh血型为阴性

上述都是血型鉴定的正定型法，临床实验室通常会在做正定型的同时做血型鉴定的反定型，以此来验证正定型结果的正确性，以免发生错误。
血型鉴定的反定型就是和正定型倒过来，用洗涤过的带有A、B抗原的标准红细胞加入待测标本的血浆中，结果判断你可以自己考虑一下，希望思考完之后你会记住，以后不会忘记了。

检验科 江烨炜

（1）对含有较多自身冷凝集素的受检者，在鉴定血型时往往被误定为AB血型，遇到此种情况，需用37℃生理氯化钠溶液洗涤受检者红细胞2～3次，以去除吸附在红细胞上的冷凝集素，然后再鉴定血型。
（2）在做配型试验时，如发现有不配合现象，则取受检者血清，用已知A或B血型红血胞进行反定型试验，以核实原鉴定的血型是否正确。
（3）用立即试管法不能测出亚型（如Ax），需延长作用时间。
（4）本品如出现浑浊或变色则不能使用，若开瓶使用时间较长后，最好用已知A、B、O血晕型红细胞检查结果是否与已知血型相符，以防制品污染、变质失效，而造成鉴定错误。
（5）在有效期内使用。

ABO 血型鉴定
1、实验原理
根据红细胞上有或无A 抗原或（和）B 抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定A B O 血型。所谓正定型，是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓反定型，是用已知A红细胞B红细胞来测定血清中有无相应的抗A或（和）抗B。
2、使用的标本种类和收集方法
2.1、受检者5％红细胞悬液
红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。
2.2、受检者血清
采取受检着静脉血2-3ml，置水浴箱中至完全凝固，3000转/分钟离心5分钟，分离上层血清备用。
2.3、标本接收
2.3.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外2.3.2规定内容）。
2.3.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。
2.4、标本容器要求：洁净一次性塑料试管
3、使用的试剂
3.1、抗A 、抗B定型试剂（单克隆抗体）
3.1.1、批准文号：国药准字S10960081
3.1.2、生产厂家：长春生物制品研究所
3.1.3、保存条件：2-8℃避光保存，有效期内使用。
2．5 ％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液
2.5.1、制备方法
分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3 次，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。
2.5.2、保存条件：配制好的5％的红细胞悬液在试管上注明红细胞血型及配制时间，2-8℃避光保存，有效期3天。
4、仪器：
4.1、仪器型号：TL80-1型医用离心机
4.2、仪器厂家：中国江苏姜岩是田里医疗器械有限公司
4.3、许可证号：苏药管械（试）字2001第2030436号
4.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序。
5、操作步骤、报告结果
5.1、 正定型：取清洁试管2支作好标记，分别加入抗A（蓝色）和抗B（黄色）标准血清各2滴。每管加入被检者5％红细胞悬液各2滴，混匀，1000转/分钟离心一分钟或在室温放置1小时，轻轻摇匀，涂至载玻片上，用显微镜观察是否凝集。
5.2、反定型：取清洁试管2支作好标记。用滴管分别加入被检者血清各2滴，A和B型5％标准红细胞悬液各2滴。混合。立即以1000转/分钟离心1分钟，轻轻摇匀，涂至载玻片上，用显微镜观察是否凝集。

5.3、结果见下表：
抗A 抗B 血型 A细胞 B细胞
+ - A - +
- + B + -
- - O + +
+ + AB - -
注：（＋） 凝集（－） 不凝集
6、注意事项
6.1、标准血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。
6.2、试剂红细胞以3 个健康者同型新鲜红细胞混合，用生理盐水洗涤3 次，以除去存在于血清中的抗体及可溶性抗原。
6.3、试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。
6.4、操作方法应按规定，一般应先加血清， 然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。
6.5、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。
6.6、观察时应注意区别真假凝集。
6.7、判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。
7、临床意义
输血已成为临床上必不可少的治疗手段，输血必须输入A B O 同型血，如输入异型血，输入的红细胞可能迅速破坏，导致严重的溶血反应， 常常威胁生命甚至造成死亡。
8、方法的局限性：本方法不能检测出亚型。

Rh（抗D）血型鉴定
1.原理：
Rh血型系统通过输血或妊娠可产生免疫性抗体，当遇有相应抗原，可致溶血反应或新生儿溶血病。若误诊误治，可导致患者残废或死亡。有条件者应作此检查。目前，一般应用5种分型血清来检查红细胞抗原。临床上，凡带有D抗原者，称为Rh阳性，不带D抗原者，称为Rh阴性。
2、使用的标本种类和收集方法
2.1、受检者2-3％红细胞悬液
红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水32滴（1.6ml）配成2-3％的红细胞悬液。
2.2、标本接收
2.2.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外2.3.2规定内容）。
2.2.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。
2.3、标本容器要求：洁净一次性塑料试管
3. 仪器和试剂：
3.1、仪器型号：TL80-1型医用离心机
3.2、仪器厂家：中国江苏姜岩是田里医疗器械有限公司
3.3、许可证号：苏药管械（试）字2001第2030436号
3.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序
3.5、Rh抗血清本科使用珠海贝索生物技术有限公司生产的Rh抗血清试剂产品注册号:国食药监械(准)字2004第3400398号

4. 操作
4.1 取小试管2支,用蜡笔标记，分别加上述Rh抗血清1滴,再加2-3%受检者红细胞盐水悬液2滴,混匀。离心：3200-3400转/min,15--30秒
4.2结果判断:轻摇试管，观察结果：如受检管凝集,即表示阳性；受检管不凝集,即表示阴性。
5、注意事项
5.1、Rh抗血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。
5.2、。试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。
5.3、操作方法应按规定，一般应先加血清， 然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。
5.4、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。
5.5、观察时应注意区别真假凝集。
5.6、判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。
5.7、当用未经洗涤的细胞作试验时，试样中的自身凝集和异常蛋白质可能引起假阳性结果。

凝聚胺介质交叉配血
原理
红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发生聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺（溶液，它是一种高阶阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后，加入凝聚胺(Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene）的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验旨果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
试剂本科使用珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺介质试剂产品注册号:国食药监械(准)字2004第3400397号
套组内容： 150T装量（BA-1003） 主要成份
1．LIM(Low Ionic Mediun) 1瓶×55ml 葡萄糖、EDTA（2Na）
2、Polybrene Solution 1瓶×7.5ml Polybrene、氯化钠
3.Resuspending Solution 1瓶×7.5ml 柠檬酸钠、葡萄糖
3、试验步骤
3.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。
3.2各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加Polybrene2滴,并混合均匀.
3.3用血库离心机3400转/分离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约液体.
3.4轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做.
3.5最后加入Resuspending2滴,轻轻转动试管混合并涂片,显微镜下观察结果：在30秒-1分钟内凝集散开,代表是由Polybrene引起的非特异性聚集,配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。
3.6。配学相合后，认真填写配血纪录单和登记本，并通知临床取血。
4、注意事项：
4.1可以用含EDTA之血浆代替血清使用。
4.2若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。
4.3本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。
4.4试剂使用前请回复室温再行操作。
4.5加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗-K的敏感性，对检测其他红细胞抗体无帮助。
4.6在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，面导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时，将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在30秒内观察结果。

离心机操作标准操作程序
1、目的：使每个工作人员能正确地使用本仪器。
2、范围：本SOP仅适用于本室普通离心机。
3、职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4、操作：
4.1 开机：接通电源，打开仪器电源开关，离心机自检。
4.2 按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，平衡放入离心管，旋紧转子盖，关上机盖，此时“Open”键的指标灯亮。（如果接通电源后，机盖为开的状态，则无需此步操作）。
4.3 离心条件的设定：通过按“Temp”、“Speed”、“Time”键的上下箭头分别设定离心的温度、速度和时间。其中离心速度可分为每分钟转速（rpm）和离心力（cfg）两种，可通过同时按下“Speed”键的上下键头相互转换。
4.4 运行：离心条件设定好后，按“Start/Stop”键，离心机启动，“Open”键的指标灯灭。当达到设定的时间后，离心机自动停止，并发出提示音，“Open”键的指标灯亮，按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，取出离心管。若需在离心过程中停止离心，则需再按一次“Start/Stop”键。
4.5 关机：离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水，关闭离心机电源，并记录离记机使用情况。

离心机维护保养操作程序
1、目的：对离心机进行正确的维护，以保证仪器正常运转。
2、适用范围：本SOP仅适用于本室使用的离心机。
3、职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4、操作程序：
4.1 离心室的清洁：为了避免样本等残留物的污染，应经常对离心机外壳和离心室进行清洁处理。对离心室清洁，应先打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转子旋下，再用中性去污剂（70%的异丙醇/水混合物或乙醇去污染）清洁离心室；离心室内的橡胶密封圈经去污剂处理后，用水冲洗，再用甘油润滑。
4.2 转子的清洁：转子会被样本残留物污染，也可能会被某些化学试剂腐蚀，因此应对转子每月进行清洁维护。每月用中性的清洁剂清洁转子一次，并在仪器使用记录本上作好记录，以延长转子的寿命。
4.3 离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水。（此步仅适用于冷冻离心机）
4.4 离心结束后，使离心机盖打开，然后关机。

血库冰箱维护保养操作程序

1.目的：
对冰箱进行适当的维护，以确保冰箱的正常使用。
2.适用冰箱范围：
本实验室使用的各种品牌、型号的冰箱。
3.职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4.操作方法
4.1 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。
4.2 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。
4.3 冰箱内禁止存放与本实验室无关的物品。
4.4 放入冰箱内的所有试剂、血液、样品等必须密封分类保存。
4.5 保持冰箱出水口通畅；非自动除霜冰箱应定期除霜；定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。
4.6 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，记录表贴于门上，每月一张，一年装订成册存档。
4.7 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。
4.8 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。
4.9定期用液体消毒剂消毒冰箱内表面。

移动紫外消毒车使用操作程序
1、目的：正确使用紫外消毒车进行消毒。
2、适用范围：适用于本室使用的ZXC型紫外线消毒车（上海跃进医用光学器械厂生厂）。
3、职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4、操作程序：
4.1 打开保护门；
4.2 用手托住灯臂往上抬至需要位置；
4.3 插上电源，打开带灯开关；
4.4 根据需要设定时间；
4.5 使用完毕将按钮摁到底，同时另一手托住灯臂慢慢将灯管放进灯箱内关上保护门。
4.6 不同实验区的紫外线消毒车勿混用。

　　由于在临床上宝宝有可能患上溶血症，这种疾病会导致宝宝们出现严重的贫血症而给他们的生命健康产生严重的伤害。所以孕妇和宝宝在在分娩后都必须做血型检查，来排查溶血症等疾病的可能，下面就为大家介绍 血型检查结果如何看 。

　　关于溶血化验单主要分为两部分：

　　1、Rh血型不合

　　首先要知道Rh阴性血型在不同人群和种族中存在差异，在我国汉族中仅为0.34%，少数民族中则在5%以上。Rh血型共有六种抗原，即C和c、D和d、E和e、D抗原是最早发现的，所以临床上凡是D抗原阳性者称为Rh阳性，无D抗原者称为Rh阴性。Rh血型的抗原中以D抗原的抗原性最强，而Rh血型抗原的抗原性决定了溶血的严重程度。

　　Rh-血型的准妈妈，所怀第一胎为Rh+血型，那么胎儿则含有D抗原，准妈妈体内无D抗原，因而准妈妈体内对抗D抗原的抗体还不够多，因此在第一胎时发生溶血病的可能性比较小。而在第二胎时，准妈妈因为在第一胎分娩时接触到了胎儿的D抗原，所以体内也产生了更多的D抗体，如果在第二胎所怀胎儿为Rh+血型的话，那么D抗体会增加，会与胎儿体内的抗原发生反应，抗体会透过胎盘把第二个婴儿的血液溶解，这样就会导致第二胎发生溶血病。

　　由于机体初次被抗原致敏的时间较长，而且自然界中极少存在Rh抗原，因此Rh血型不合溶血病很少在第一胎产生。但也有少数情况会导致Rh溶血发生在第一胎，主要是由于以下原因所引起。

　　1)孕妇在妊娠前曾输注Rh血型不合的血液或血制品。

　　2)当孕妇在胎儿期，接触过Rh血型不合之母亲的血液，在胎儿或新生儿时期就已经致敏。

　　2、ABO血型不合

　　ABO血型不合而导致的溶血是我国新生儿溶血病的主要原因，占96%左右，而母体为O型者占ABO溶血症的95%以上，但专家强调，这不代表O型血型妈妈生的孩子一定会有问题。一般来说，只要胎儿存在母体没有的抗原，那么就有发生溶血症的可能。如果O型血准妈妈在孕前没接触过ABO血型抗原的话，那么体内既无抗A也无抗B，所怀第一胎不会发生ABO溶血。

　　大多数O型血孕妇在妊娠前就有机会接触ABO血型抗原，如肠道寄生菌中有血型抗原;又或者是某些疫苗中含有ABO血型抗原，如伤寒疫苗、破伤风疫苗或白喉疫苗等;自然界中的植物或动物中含有ABO血型抗原。这样体内的抗A/抗B抗体会增加，遇到胎儿的抗A/抗B时会发生反应，从而导致溶血。

　　1、AB0血型鉴定原理

　　(1)生理盐水凝集法：①玻片法：操作简单，适于大量标本检查，但反应时间长。被检查者如血清抗体效价低，则不易引起红细胞凝集，因此，不适于反向定型。②试管法：由于离心作用可加速凝集反应，故反应时间短，而且，借助于离心力可以使红细胞接触紧密，促进凝集作用，适于急诊检查。

　　(2)凝胶微柱法：是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体，加入试剂、标本，用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准化，定量加样，确保结果准确性。

　　2、抗A、抗B和抗AB标准血清标准

　　准血清均采自健康人，并应符合下述条件：①特异性：只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集。②效价：我国标准抗A和抗B血清效价均在1：128以上。③亲和力：我国标准要求抗A对A1、A2及A2B发生反应开始出现凝集的时间分别是15s、30s和45s。抗B对B型红细胞开始出现凝集的时间为15s。凝集强度为3min时，凝块不小于1mm2。④冷凝集素效价：在1：4以下。⑤无菌。⑥灭活补体。

精彩推荐：

孕妇不能吃的水果

孕妇不能吃哪些食物

孕妇吃什么水果好

孕中期注意事项

孕晚期注意事项