细胞多久换液

谢谢悟空邀请

癌症病人外科手术后多长时间可以接受化疗，这得医生根据病人手术后的身体恢复情况和病情程度而定了。

化疗是全身用药，是对有可能已“开溜”转移了的癌细胞的剿杀，剿杀的效果对之后的治疗结果至关重要。化疗药物在杀灭癌细胞的同时对正常细胞也是一场极大的伤害。没作过外科手术的病人都很难承受化疗所带来的系列药物反应及随即而来的毒副作用的，更何况手术过的病人了。

癌症病人手术后应积极的补充营养以弥补手术对身体的损伤外，还得努力的蓄备体能应对即将而来的化疗对身体的再次甚至多次伤害，只有顺利通过了医生根据病情制定的治疗方案后，才有可能获得期待的结果的。

希望我的回答对你有所帮助，希望病人早日康复。

每隔3天进行换液，在换液时，缓慢加入培养基，避免吹起细胞。
一、6孔板：1。将处于对数生长期的细胞胰酶消化后，完全培养基（基础培养基+10%胎牛血清）重悬成细胞悬液，并计数，2。细胞接种：于6孔板培养板中各实验组接种400-1，000个细胞/孔（根据细胞生长情况确定，一般为700个细胞/孔），3。继续培养到14天或绝大多数单个克隆中细胞数大于50为止，中途每隔3天进行换液并观察细胞状态，4。克隆完成后，在显微镜下对细胞进行拍照，然后PBS洗涤1次，每孔加入1，mL，4%多聚甲醛固定30-60，min，PBS洗涤1次，5。每孔加入结晶紫染液1ml，染细胞10-20，min，6。PBS，洗涤细胞数次，晾干，数码相机拍照（分别对整个六孔板及每个孔进行单独拍照）。注意事项：1。每隔3天进行换液，在换液时，缓慢加入培养基，避免吹起细胞。2。染色完成后，务必将染液清洗干净，不要在孔中有残留。
二、平皿：1。取对数生长期的各组细胞，分别用0。25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在完全培养基（基础培养基+10%胎牛血清）中备用。2。将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组5个平行样。每组细胞每皿分别接种100个细胞于含10ml，37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。3。置37℃、5%，CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。4。当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。5。加纯甲醇或1：3醋酸/甲醇5ml，固定15分钟。6。去固定液，加适量Giemsa应用染色液染10～30分钟7。用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。8。将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率=（克隆数/接种细胞数）×100%注意事项：平板克隆形成实验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。实验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。数据分析：显微镜下观察阳性克隆，即每个克隆>50个细胞，相机拍照，数克隆数（大小约在0。3-1。0，mm）计算克隆形成率，并统计克隆大小。